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即刻打开尊龙凯时mRNA高效纯化新思路,轻松告别复杂过程!

发布时间:2025-03-24   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在生物医疗领域,mRNA技术作为一种创新的平台技术,广泛被应用于预防性疫苗、治疗性疫苗、肿瘤治疗、免疫治疗、蛋白替代和基因编辑等多个方面。mRNA的体外转录合成过程中,会生成所需的mRNA产物以及反应酶(如T7RNA聚合酶和无机焦磷酸酶)、NTP、DNA模板、盐离子及副产物(例如dsRNA和截断RNA片段)等杂质。这些杂质不仅影响mRNA的定量精度,还降低了蛋白翻译效率,并可能引发免疫原性。因此,体外转录后的噪音去除至关重要,以提高目标产物的纯度和完整性,确保产品的安全性和有效性。

即刻打开尊龙凯时mRNA高效纯化新思路,轻松告别复杂过程!

目前常用的mRNA纯化方式有氯化锂(LiCl)沉淀、磁珠纯化、硫酸铵沉淀和亲和层析等方法。虽然沉淀法和磁珠法操作简单且迅速,但它们的适用量较小,因此一般用于早期研发阶段。在工业生产中,层析纯化是主要的纯化方法,但通常需要特殊的纯化设备。为了解决这一痛点,尊龙凯时推出了一款轻量级的mRNA亲和层析纯化试剂盒,利用此试剂盒可以在无需专业设备的情况下,快速完成mRNA的纯化,并在30分钟内获得高纯度和低NTP残留的目标产物,适合用于各类下游实验。

氯化锂(LiCl)沉淀法

LiCl沉淀法的原理是利用锂离子在特定pH条件下能降低RNA分子间的同电性排斥,使得RNA更容易聚集并沉淀。操作步骤包括将IVT产物加入LiCl溶液并在-20°C下放置,离心后取出沉淀,随后加入冷却的70%乙醇再次离心。该方法在工业生产中因锂盐的潜在毒性和对低温条件的要求,增加了能源成本并对设备提出了更高的要求。

磁珠纯化法

磁珠纯化法可分为Oligo(dT)磁珠和羧基磁珠。Oligo(dT)磁珠通过表面的亲和配体与带Poly(A)尾的mRNA特异性结合,从而利用磁力分离目标RNA与非特异性杂质。羧基磁珠则利用mRNA在酸性条件下的负电荷,借助静电作用实现纯化。该方法能有效去除蛋白、盐离子及其他杂质,但在实践中要避免过度干燥和高速离心,以维护磁珠的效果。

硫酸铵沉淀法

硫酸铵沉淀法以其高效的回收率和对杂质(如DNA模板和dsRNA)的去除能力,成为一种理想的选择。通过加入硫酸铵溶液,使目标mRNA沉淀并离心收集。此方法不需要专业设备,适合IVT体系或后续工艺中快速分离mRNA的需求。

亲和层析

传统亲和层析依赖于OligodT亲和色谱,利用高盐条件下的电荷屏蔽效应捕获mRNA,虽然收率可达90%以上,但通常依赖专业设备。尊龙凯时的轻量级亲和层析纯化试剂盒无需复杂设备,仅需离心即可在30分钟内完成样本纯化,同时保证高质量的mRNA。

产品优势

该试剂盒能够适用于不同起始量的RNA样品,无论是mg级mRNA样本均可实现无需纯化设备和低温环境,简化操作,降低设备和人力成本。此外,纯化后的mRNA在完整度和NTP去除效果上显著优越,可实现30分钟内迅速完成,满足各种实验需求。

综上所述,尊龙凯时提供的解决方案不仅在mRNA纯化过程中节省了时间和成本,还确保了产品质量的高度可信,适合现代生物医疗领域的多样化需求。