羊口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测试剂盒（酶联免疫法）使用说明书

产品名称

通用名：羊口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名：Test Kit for Antibodies to Sheep Foot and Mouth Disease Virus NSP (ELISA)

包装规格

96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

预期用途

羊口蹄疫是一种由羊口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease Virus，FMDV）引起的偶蹄动物急性、高度传染性的疾病，其主要特征为口腔黏膜、蹄部以及乳房皮肤发生水泡和溃疡。本试剂盒的设计旨在检测羊血清中的口蹄疫病毒非结构蛋白（NSP）抗体，适用于口蹄疫病毒感染的筛查及辅助诊断，致力于提升羊群的健康管理和监测。

原理

本试剂盒包含预包被口蹄疫病毒非结构蛋白重组抗原的酶标板、酶标记物和其他配套试剂，通过酶联免疫法（ELISA）原理检测羊血清和血浆样本中的口蹄疫病毒非结构蛋白抗体。在实验中，加入对照血清和待检测样本，若样本中含有口蹄疫病毒非结构蛋白抗体，便会与酶标板上的抗原结合。清洗后添加酶标记物，形成特异性结合。最终加入底物液进行显色，显色深浅与样品中的抗体含量成正相关。通过酶标仪在450nm波长下检测吸光值，以判断样品中抗体的存在。

试剂盒组成

本试剂盒包含以下组件：

• 酶标记物：规格依盒数不同而异
• 样品稀释液：规格依盒数不同而异
• 浓缩洗涤液：规格依盒数不同而异
• 底物液A/B：规格依盒数不同而异
• 终止液：规格依盒数不同而异
• 阳性对照：规格依盒数不同而异
• 阴性对照：规格依盒数不同而异
• 酶标板：规格依盒数不同而异
• 附加膜及自封袋：规格依盒数不同而异
• 说明书

储存及有效期

本试剂盒应在2～8℃的条件下储存，有效期为12个月。开封后的包被板需于2～8℃避光保存，避免潮湿，使用期限为2个月。

适用仪器

适用于具备450nm、630nm波长的酶标仪、37℃恒温设备以及可调微量移液器。

样品准备

1. 采用常规方法制备动物全血样本，确保血清清亮且无溶血或污染。样本应在1周内于2～8℃保存，长期存储需置于-20℃。

2. 首先用样品稀释液将待检血清稀释至10倍浓度。阴性和阳性对照不需稀释。

3. 使用前将浓缩洗涤液恢复至室温后，进行20倍稀释，制备工作洗涤液。

检验方法

1. 使用前将试剂盒置于室温30分钟以恢复其温度。

2. 将所需数量的酶标板条取出，设立阴性和阳性对照各2孔，未用完的板条需速封存于2～8℃。

3. 对照孔分别加入阴、阳性对照100μl，每个样本孔加入样品稀释液90μl与10μl的血清混合。

4. 混匀后覆盖盖板膜，在37℃避光条件下反应30分钟。

5. 清洗多次后，添加酶标记物，继续在37℃反应30分钟。

6. 再次清洗后，依次添加底物液A和B各50μl，混合后在37℃避光反应10分钟。

7. 加入终止液进行反应终止，然后测定各孔的吸光值（A值）。

参考值与结果解释

在正常实验条件下，阴性对照A值应≤0.10，阳性对照应≥0.60。样品A值≥0.38为阳性，<0.38为阴性。阳性结果需结合临床及其他检测数据综合分析。

注意事项

1. 实验过程中应佩戴手套和工作服，严格遵循消毒隔离制度，处理实验废弃物应按传染物处理。

2. 终止液具有腐蚀性，避免接触皮肤和衣物，若接触需立即用大量水冲洗。

3. 酶标板需在室温下开袋，未用完的板条要储存在有干燥剂的密封袋内。

4. 为保证实验有效性，使用的样品应保持新鲜，判定结果应以酶标仪读数为依据，而且不同批号的试剂组分不得混用。

通过使用尊龙凯时的羊口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测试剂盒，您将能有效监测羊群健康状况，提高养殖效率，确保动物健康。